一、儀器概述與核心作用  

3730xl 基因分析儀采用雙光束雙側激光激發(fā)、光柵分光裝置和后置超薄CCD檢測成像系統(tǒng)，配合POP-7液體分離膠和動態(tài)內鍍毛細管壁技術，在提高數(shù)據(jù)質量的同時最大限度降低試劑消耗。其核心作用涵蓋以下領域：  

DNA測序：菌液、質粒、PCR產物測序，F(xiàn)osmid/Cosmid/BAC雙末端測序，大片段法測序，EST測序和分析，步移測序等。  

片段分析：微衛(wèi)星DNA（STR）分型、AFLP分析、LOH分析、SSCP分析等。  

SNP分析：單核苷酸多態(tài)性篩選與驗證，重測序應用。  

基因突變檢測：微生物與病毒的分型與鑒定。  

定量分析：基因片段大小分析和定量分析。  

在技術參數(shù)方面，3730XL一次電泳可測定96個樣品，一天可運行多達12次測序電泳，日測序產率可達1152個樣品。精確讀長可達800～1000bp，單堿基準確率高達99.99%，片段分析分辨率精確到0.05bp。  
 

二、3730xl 基因分析儀標準使用流程  

開機與初始化  

3730XL系統(tǒng)由儀器和計算機兩部分組成，必須按正確順序啟動，否則可能導致通信故障、運行中斷甚至數(shù)據(jù)丟失。正確的開機順序為：  

先開啟計算機，以本地管理員（Administrator或INSTR-ADMIN）身份登錄。  

再按下儀器電源按鈕，等待綠色指示燈亮起。  

啟動DataCollectionSoftware（數(shù)據(jù)采集軟件），等待所有4項服務均顯示為綠色。  

樣品準備與上機  

樣品準備是保證數(shù)據(jù)質量的關鍵環(huán)節(jié)。以微衛(wèi)星基因分型為例，典型流程包括：DNA提取→PCR擴增→產物稀釋→與Hi-Di甲酰胺及內標（如LIZ500）混合→離心→上機分析。  

上機時需注意：  

將樣品板放入自動進樣器堆疊機，儀器內置條形碼閱讀器可自動識別樣品信息。  

儀器可容納16塊96孔或384孔樣品板連續(xù)運行，實現(xiàn)全自動進樣。  

根據(jù)實驗需求選擇合適的運行模塊（短片段測序、快速測序、標準測序或長片段測序）。  

數(shù)據(jù)采集與分析  

3730XL配套完整的軟件套件：  

DataCollectionSoftware：管理儀器設置，控制運行，實時數(shù)據(jù)可視化。  

SequencingAnalysisSoftware：自動堿基識別、質量值分配、數(shù)據(jù)修剪與編輯。  

GeneMapper：可配置的自動等位基因檢出，適用于高通量基因分型。  

SeqScape：重測序應用分析。  

運行結束后，軟件自動完成堿基判讀和質量評分（QV），用戶可進一步在GeneMapper中進行基因型分析、等位基因判定和結果導出。  

三、維護保養(yǎng)體系  

3730xl 基因分析儀的維護任務按頻率分為日常、周度、月度和按需維護四個層級。  

日常維護  

檢查陽極和陰極緩沖液液位，確保在填充線以上，防止毛細管或陣列干燥。  

檢查廢液容器是否需要清空。  

運行結束后執(zhí)行常規(guī)清洗程序。  

周度維護  

建議每周重啟一次系統(tǒng)，以清除潛在的通信問題或軟件緩存異常。  

檢查POP-7聚合物狀態(tài)。聚合物在儀器上可保持穩(wěn)定約7天，超過7天需執(zhí)行WaterWashWizard并更換新鮮聚合物。切勿將新鮮聚合物添加到舊聚合物中（"topoff"），以免影響數(shù)據(jù)質量。  

緩沖液有效期約48小時，每次新運行前需更換新鮮配制的1XRunningBuffer。  

月度及按需維護  

檢查毛細管陣列狀態(tài)。陣列的保修期為一定運行次數(shù)或收貨后一年（以先到者為準）。當出現(xiàn)讀長縮短、四色拖尾峰等數(shù)據(jù)質量下降跡象時，應及時更換。  

檢查注射器、聚合物輸送系統(tǒng)的工作狀態(tài)。  

檢查硬盤D、E、F盤可用空間，及時清理過期數(shù)據(jù)記錄。  

關機管理  

短期關機（閑置不超過一周）：執(zhí)行短期關機向導即可。  

長期關機（閑置超過一周）：使用InstrumentShutdownWizard執(zhí)行長期關機程序。  

關機順序：先在ServiceConsole中點擊"StopAll"，等待4項服務變綠后關閉軟件，再關閉計算機，最后關閉儀器電源。  

四、注意事項  

操作規(guī)范  

嚴格遵循開機/關機順序：不正確的啟動順序可能導致通信中斷和數(shù)據(jù)丟失。  

使用指定試劑：不建議混用不同型號的儀器試劑，各試劑按不同工藝制造，混用可能損害系統(tǒng)完整性。  

試劑有效期管理：過期試劑可能影響數(shù)據(jù)完整性，廠商僅對未過期試劑提供性能保證。  

信號強度控制：3730XL原始數(shù)據(jù)的最大信號閾值為32,000rfu，出現(xiàn)平頂?shù)姆澹╫ffscale）時需減少模板量或縮短注射時間。  

樣品處理  

樣品需避光保存，防止熒光染料降解。  

在Hi-Di甲酰胺中浸泡超過6小時的樣品板應熱封保存（3730XL可自動穿刺熱封板）。  

模板DNA的質量和濃度直接影響測序質量，建議使用新鮮制備的DNA，并參照推薦用量。  

環(huán)境與軟件  

儀器使用標準110V或220V電源，簡化安裝和實驗室桌面部署。  

儀器計算機可連接局域網(wǎng)，但需注意：因網(wǎng)絡連接導致的系統(tǒng)問題（如病毒、攻擊、系統(tǒng)更新等）不在保修范圍內。  

數(shù)據(jù)采集軟件許可證需每年續(xù)期，續(xù)期免費但需聯(lián)網(wǎng)操作。  

溫控爐范圍為18～70℃，較高的電泳溫度有助于去除DNA二級結構的影響。